本发明公开了一种iPS细胞分化成外胚层祖细胞的无血清诱导培养基及诱导方法。该无血清诱导培养基是通过在每500ml DMEM/F12基础培养基中添加终浓度为8μM的吲哚美辛、体积百分比1％的谷氨酰胺、体积百分比1％的非必需氨基酸、10μM的SB431542、12ng/ml的EGF、0.1mmol/mlβ巯基乙醇、0.4μg/ml的氢化可的松、60μg/ml的胰岛素、100μg/ml的转铁蛋白、10ng/ml的亚硒酸钠、0.1mg/ml的青霉素以及0.1mg/ml的链霉素制备得到。通过使用上述iPS细胞分化成外胚层祖细胞的无血清诱导培养基及诱导方法可以将iPS细胞定向诱导分化为外胚层祖细胞，从而为iPS诱导分化为成体的各个细胞，尤其是皮肤相关细胞提供了技术支持。